兔血清使用方法和注意事項
使用方法:
1、稱取本品23.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
2、樣品的稀釋及處理,略。
3、根據商檢的標準要求或對標本污染情況的估計,選擇2—3個稀釋度,分別在10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內,每個稀釋度做兩個平皿。
4、稀釋液移入平皿后,應及時將涼至45℃的瓊脂培養基(可放置于45℃水浴箱保溫)注入平皿約15mL,并轉動平皿使混合均勻。同時將瓊脂培養基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內作空白對照。
5、待瓊脂凝固后,翻轉平板,置36±1℃溫箱內培養48±2h。
6、觀察結果并進行計數。25-250個菌落為合適范圍。
兔血清保存注意事項:
1、需要長期保存的兔血清必須儲存于-20℃ - -70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過1月,由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預留定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。
2、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。